亚硝酸盐广泛存在于土壤、水、蔬菜及腌制的动物性食物中,也是广泛存在于自然环境中的化学物质。自然界中的许多食物，包含粮食、蔬菜、鱼类、蛋类、肉类中都含有亚硝酸盐。蔬菜是人们日常日子中摄入量最多的，也是一种易于富集硝酸盐的植物性作物。

  据世界粮农安排1990年核算，人体所需的90%维生素C、60%维生素A均来自蔬菜，蔬菜供给人体所需维生素的一起，也供给了进入人体80%～90%的硝酸盐。现代医学证明，尽管硝酸盐对人体没有直接毒害效果，但过量的硝酸盐进入人体后，在一些酶和微生物效果下可转变为有毒的亚硝酸盐。亚硝酸盐是强氧化剂，进入血液与血红蛋白结合，使氧合血红蛋白变为高铁血红蛋白，然后失掉携氧才能,导致安排缺氧，而呈现一系列缺氧的中毒病症，严峻时可使人逝世。别的，亚硝酸盐对血管有扩张效果，它还可与胃中的次级胺结合构成致癌物质亚硝酸胺，引起消化系统癌变；亚硝酸盐也可以终究靠胎盘进入胎儿体内，引起胎儿畸变。因而,硝酸盐和亚硝酸盐含量是点评蔬菜质量的重要目标之一。

  挑选以黄瓜为例的瓜类、以白菜为例的绿叶类、以茄子为例的茄果类蔬菜作为试材。

  1、饱满硼砂溶液（50g/L）：称取5.0g硼酸钠(Na2B07·10H2O)，溶于100mL热水中，冷却后备用。

  4、对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%（V/V）盐酸中，混匀后，至棕色瓶中，避光保存。

  5、N-(1-萘基)-乙二胺盐酸盐溶液(2g/L):称取0.2gN-(1-萘基)-乙二胺盐酸盐，溶入少数水中后悉数转移至100mL容量瓶中，加水至标线，混匀。置于棕色瓶避光保存。

  6、亚硝酸钠规范溶液（100g/L）:精确称取0.1000g于硅胶枯燥器中枯燥24h的亚硝酸钠，加水移入1000mL容量瓶，加水稀释至刻度，混匀。

  7、亚硝酸钠规范溶液（10g/L）：临用前，汲取10mL亚硝酸盐规范溶液，置于100mL容量瓶，加水稀释至刻度。

  所用试剂未注明均为剖析纯，实验用水均为去离子水。一切实验用的玻璃仪器均用去离子水冼涤使其彻底洁净，以保证无外来硝酸根离子(NO3-)和亚硝酸根离子(NO2-)的搅扰。

  选用国家规范（GB5009.33-2010）盐酸萘乙二胺法。制造一系列各浓度的亚硝酸盐溶液：取10ug/mL亚硝酸钠规范运用液0.00mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.60mL、2.00mL，别离置于50mL带塞比色管中。于规范管中别离参加2mL对氨基苯磺酸溶液，混匀，放置3-5min，参加1mL盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用2cm比色皿，以零管调理零点，于波长538nm处测吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，制作亚硝酸盐的规范曲线。

  参阅马巍（1999）[8]办法，选用加外标回收率的办法验证样品消解丢失程度和办法的精确度。

  制造10ug/mL亚硝酸盐规范溶液，移取0.8mL的该规范溶液于50mL比色管内，依照重氮化偶合法在538nm处重复测定标样7次，核算吸光度的均匀值和规范均匀偏差。

  由规范曲线）可知，规范作业曲线线性杰出，不同浓度的亚硝酸盐在538nm处的吸光度是呈线性规则，其回归方程为y=0.6489x+0.0023，线以上。

  由图2可以精确的看出，不一样的温度下溶液对亚硝酸盐的溶解量及提取速度存在必定的差异，100℃时，水浴时刻45min提取的亚硝酸盐含量最高；70℃时，水浴时刻45min提取的亚硝酸盐含量最高，但两种温度比较70℃水浴下提取的亚硝酸盐含量更为高，因而提取亚硝酸盐的最佳水浴条件是70℃的水浴45min。

  不同显色时刻对亚硝酸盐检测成果的影响测定成果（见图3）显色15min时，亚硝酸盐含量检出率最高，之后跟着显色时刻的延伸，亚硝酸盐的吸光度变小，35min后虽稍有上升，但起伏不大。亚硝酸盐和显色剂反应可生成络合物，显色15min时，其吸光度最大。故宜挑选15min作为显色时刻。

  活性炭对亚硝酸盐含量的测定成果（见图4）可以精确的看出，参加活性炭的实验组样品中亚硝酸盐检出值为3.50mg/kg，无活性炭的实验组样品亚硝酸盐检出值为1.00mg/kg，二者差异极明显。活性炭可消除抗坏血酸对亚硝酸盐测定的搅扰，使得亚硝酸盐检出值更为精确。因而，宜挑选参加活性炭处理，以进步检出率。

  样品亚硝酸盐回收率实验测定成果（见表1）标明，3个样品的亚硝酸盐回收率别离为91.11%、91.00%、102.00%，均匀回收率为94.63%，相对均匀偏差为5.1%。检出限数值越低，仪器和办法的灵敏度越高；内标回收率越高，仪器的精确度和精密度越高；外标回收率越高，消解丢失程度越低，办法精确度越高。在运用分光光度法对样品进行测守时，常常要测出所用办法的待测元素的回收率，以此点评办法的精确度和可靠性，回收率越挨近1，则办法的可靠性越高。

  由精密度实验测定成果（见表2）可见，经过重复测定标样七次和核算吸光度的重复性，亚硝酸盐的相对规范偏差为0.29%，小于2%，标明彻底可满意实验精密度要求。

  选用国标（GB5009.33-2010）盐酸萘乙二胺法测定蔬菜中亚硝酸盐，样品前处理的最佳条件是在70℃水浴45min，显色15min，参加活性炭进行消除抗坏血酸处理，均匀回收率可到达94.63%，亚硝酸盐的相对规范偏差为0.29%，相对均匀偏差为5.1%。